技術(shù)文章
Technical articles小鼠腦微血管內(nèi)皮細胞分離自卵巢組織；卵巢是雌性動物的生殖器官，卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同，僅左側(cè)發(fā)育（右側(cè)已退化），呈葡萄狀，均為處于不同發(fā)育時期的卵泡，卵泡呈黃色，卵巢表面密布血管。細胞可采用加入等量新鮮培養(yǎng)基后直接吹打分散進行傳代，或用自然沉降法加入新培養(yǎng)基后再吹打分散進行傳代。實驗步驟：①入無菌室之前用肥皂洗手，再用75%的酒精擦拭消毒雙手；②倒置顯微鏡下觀察細胞形態(tài)，確定細胞是否傳代及細胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預(yù)熱；③超凈臺臺面...
小鼠骨髓內(nèi)皮祖細胞來源內(nèi)皮祖細胞分離自骨髓；骨髓是機體的造血組織，位于身體的許多骨骼內(nèi)。成年動物的骨髓分兩種：紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用，白細胞能殺滅與抑制各種病原體，包括細菌、病毒等；某些淋巴細胞能制造抗體。因此，骨髓不但是造血器官，它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中，是一種海綿狀的組織，能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色，稱為紅骨髓。小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細胞采用沖洗骨髓、...
通過大量的小鼠神經(jīng)元細胞培養(yǎng)，積累了豐富的培養(yǎng)經(jīng)驗，以及對于其中的難點有了自己的一些見解。小鼠神經(jīng)元的大小并不能一概而論，應(yīng)該說每個腦區(qū)的神經(jīng)元大小均不一致，就是每個核團的神經(jīng)元大小也不相同，大神經(jīng)元直徑長軸有30-40um，短軸20-25um，中型神經(jīng)元應(yīng)該是長軸20-30um，短軸15左右，小神經(jīng)元長軸10-20um，短軸8um左右。做冰凍切片的并不需要每個神經(jīng)元都觀察，而是觀察每個神經(jīng)核團即可，因此取片應(yīng)該隔二取一或者隔三取二均可。神經(jīng)元的分離可以選用密度梯度離心的方法...
癌細胞株(CellStrain)是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法，由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。原代培養(yǎng)物經(jīng)*傳代成功后即為細胞系(cellline)，由原先存在于原代培養(yǎng)物中的細胞世系所組成。如果不能繼續(xù)傳代，或傳代次數(shù)有限，可稱為有限細胞系(finitecellline)，如可以連續(xù)培養(yǎng)，則稱為連續(xù)細胞系(continuouscellline)，培養(yǎng)50代以上并無限培養(yǎng)下去。所以細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細...
一、神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育與神經(jīng)干細胞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育起始于胚胎早期的神經(jīng)管和神經(jīng)嵴，其中央管在發(fā)育的終末形成腦室系統(tǒng)和脊髓的中央管，管腔內(nèi)面被覆的細胞為神經(jīng)上皮(neuroepithelium)，具有活躍的增殖和分化能力，在胚胎早期此區(qū)域稱為腦室／腦室下區(qū)(ventricular/subventricularzone，VZ／SVZ)，而在成年后則稱為室管膜／室管膜下區(qū)(ependymal/subepen-dymalzone，EZ／SEZ)，在神經(jīng)發(fā)生(neurogenesis)過程中起...
小鼠結(jié)腸上皮細胞原代細胞帖壁原代細胞(primarycell)是指從機體的組織(如人組織、小鼠組織、大鼠組織和兔組織等)經(jīng)蛋白酶或其它的方法獲得單個細胞并在體外進行模擬機體培養(yǎng)的細胞，稱為原代細胞。一般認(rèn)為，培養(yǎng)的原代的第1代細胞和傳代到第10代以內(nèi)的細胞統(tǒng)稱為原代細胞培養(yǎng)。在人工條件下使其原代細胞生存、生長、繁殖和傳代，進行細胞生命過程、細胞癌變、細胞工程等問題的研究。細胞株(cellstrain)是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)細胞中獲得具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志物的細胞稱為細...
大鼠肝微粒體是肝、腸、腎等器官經(jīng)過差速離心制備的亞細胞成分，是細胞器內(nèi)質(zhì)網(wǎng)一部分，該部分表達有種類多樣的蛋白質(zhì)。特別是肝微粒體，具有完整的I相代謝酶（如細胞色素P450、黃素單加氧酶、單胺氧化酶等），II相代謝酶（如葡萄糖醛酸轉(zhuǎn)移酶，硫酸基轉(zhuǎn)移酶）、酯酶等。肝微粒體能體現(xiàn)絕大部分人體內(nèi)藥物代謝的情況，是FDA指導(dǎo)原則的預(yù)測人體內(nèi)代謝及抑制試驗的研究工具。肝微粒體和細胞漿定制服務(wù)具有以下優(yōu)勢：一、具有多年肝S9、肝微粒體和細胞漿分離提純經(jīng)驗，技術(shù)路線成熟可靠；二、定制服務(wù)周期短...
大鼠肝S9是大鼠肝實質(zhì)細胞勻漿液的去線粒體上清液，包含了大量的CYPs等藥物代謝酶，其在藥物體外代謝的研究中具有快速簡便、靈敏、經(jīng)濟且可進行高通量篩選的特點，因此常用作體外研究藥物代謝和藥物相互作用的工具。許多致癌劑的生物轉(zhuǎn)化是依靠細胞內(nèi)微粒體混合功能氧化酶系來完成的，所以肝S9是許多體外研究致癌劑生物轉(zhuǎn)化的活化系統(tǒng)。傳統(tǒng)的肝S9誘導(dǎo)劑為多氯聯(lián)苯，其誘導(dǎo)效果比單獨用β-奈黃酮要好，但其是致癌劑，一種嚴(yán)重的環(huán)境污染物，現(xiàn)許多國家已禁止生產(chǎn)。現(xiàn)研究表明聯(lián)合誘導(dǎo)法可以達到多氯聯(lián)苯誘...
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